摘要:
目的 探討臭椿酮對順鉑(DDP)耐藥胃癌細胞株SGC-7901/DDP耐藥性的影響及其機制。方法 采用噻唑藍(MTT)法檢測不同質(zhì)量濃度臭椿酮對SGC-7901/DDP細胞活力的影響以篩選無毒作用濃度。將體外培養(yǎng)的SGC-7901/DDP細胞分為臭椿酮低濃度(0.2 mg/mL)+DDP(2 μg/mL)組、臭椿酮中濃度(0.4 mg/mL)+DDP(2μg/mL)組、臭椿酮高濃度(0.8 mg/mL)+DDP(2 μg/mL)組考察臭椿酮對SGC-7901/DDP細胞DDP敏感性的影響;將體外培養(yǎng)的SGC-7901/DDP細胞分為對照組、DDP(2 μg/mL)組、DDP(2 μg/mL)+Pifithrin-α(20 μmol/L)組、臭椿酮(0.8 mg/mL)+DDP組、臭椿酮+DDP(2μg/mL)+Pifithrin-α(20 μmol/L)組考察p53信號通路與藥物作用的關(guān)系;采用MTT法檢測SGC-7901/DDP細胞活力,流式細胞儀檢測SGC-7901/DDP細胞凋亡率,免疫印跡法檢測SGC-7901/DDP細胞中LC3Ⅱ、LC3Ⅰ、Beclin1和p53蛋白表達水平。結(jié)果 0.2、0.4、0.8 mg/mL臭椿酮對SGC-7901/DDP細胞未產(chǎn)生明顯細胞毒性。與DDP組相比,臭椿酮低濃度+DDP組、臭椿酮中濃度+DDP組、臭椿酮高濃度+DDP組細胞活力明顯降低,凋亡率、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ值和Beclin1、p53蛋白表達水平明顯升高(P<0.05),且呈濃度依賴性;而DDP組和對照組之間差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05);給予Pifithrin-α作用后的DDP+Pifithrin-α組和臭椿酮+DDP+Pifithrin-α組細胞活力較相應對照DDP組、臭椿酮+DDP組明顯升高,而細胞凋亡率、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ值和Beclin1、p53蛋白表達水平較DDP組、臭椿酮+DDP組明顯降低(P<0.05)。結(jié)論 臭椿酮可通過p53通路誘導自噬逆轉(zhuǎn)SGC-7901/DDP細胞對DDP的耐藥性。