摘要:
目的 運用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)的方法考察共軛亞油酸改善特應(yīng)性皮炎的作用機制,并通過動物進行實驗驗證。方法 借助Swiss Target Prediction、STITCH數(shù)據(jù)庫獲取共軛亞油酸的作用靶點,DisGeNET、GeneCards、TTD數(shù)據(jù)庫檢索與特應(yīng)性皮炎相關(guān)的靶標(biāo),利用Venny 2.1.0工具獲取共軛亞油酸與特應(yīng)性皮炎的交集靶點。采用STRING 11.0數(shù)據(jù)庫聯(lián)用Cytoscape 3.9.0軟件構(gòu)建交集靶點的蛋白相互作用(PPI)網(wǎng)絡(luò),并篩選共軛亞油酸改善特應(yīng)性皮炎的核心靶點,并進行基因本體(GO)功能富集分析和京都基因與基因組百科全書(KEGG)通路分析。將32只雌性昆明小鼠隨機分為對照組、模型組、共軛亞油酸(100 mg/kg)組和地塞米松(0.1 mg/kg)組,每組8只。采用局部涂抹2,4-二硝基氟苯(DNFB)建立特應(yīng)性皮炎小鼠模型,并比較各組小鼠皮損評分、皮膚組織病理學(xué)形態(tài)以及Th1/Th2型細胞因子水平。進一步通過免疫組化檢測各組小鼠皮損中核心靶點PPARG的表達情況。結(jié)果 網(wǎng)絡(luò)數(shù)據(jù)庫共篩選出共軛亞油酸作用靶點108個,特應(yīng)性皮炎相關(guān)靶點基因1 708個,取交集后得到48個共軛亞油酸可能作用的特應(yīng)性皮炎靶點。核心靶點與KEGG通路分析結(jié)果顯示,共軛亞油酸主要作用于過氧化物酶體增殖物激活受體γ(PPARG)、脂聯(lián)素基因(ADIPOQ)等核心靶點及PPAR信號通路改善特應(yīng)性皮炎皮損癥狀。動物實驗結(jié)果發(fā)現(xiàn),與模型組比較,共軛亞油酸組小鼠皮損評分顯著降低,炎癥細胞或肥大細胞的浸潤明顯減輕,Th1/Th2型細胞因子[免疫球蛋白E(IgE)、白細胞介素-4(IL-4)、γ干擾素(IFN-γ)]水平顯著降低(P<0.05、0.01)。免疫組化檢測結(jié)果則發(fā)現(xiàn),共軛亞油酸能顯著性上調(diào)特應(yīng)性皮炎小鼠皮損中PPARG的表達。結(jié)論 通過網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)和動物實驗初步驗證了共軛亞油酸對特應(yīng)性皮炎的改善作用及其可能的作用機制,為共軛亞油酸后續(xù)深入基礎(chǔ)實驗研究和臨床合理應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。