3;幽門螺桿菌;胃上皮細(xì)胞;網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué);凋亡;氧化應(yīng)激"/> 3對(duì)Hp造成的胃上皮細(xì)胞損傷的保護(hù)作用及機(jī)制。方法 使用Herb數(shù)據(jù)庫收集“三七”的相關(guān)預(yù)測(cè)靶點(diǎn),使用Gene Cards數(shù)據(jù)庫收集Hp相關(guān)疾病的靶點(diǎn);使用Draw Venn Diagram網(wǎng)站繪制Venn圖,得到靶點(diǎn)交集;進(jìn)行蛋白互作(PPI)網(wǎng)絡(luò)分析、基因本體(GO)和京都基因與基因組百科全書(KEGG)富集分析。將GES-1細(xì)胞分為對(duì)照組、模型組及人參皂苷Rb3低、中和高濃度(1、5、10 μ mol· L-1)組,人參皂苷Rb3組使用相應(yīng)濃度的人參皂苷Rb3預(yù)處理,培養(yǎng)過夜12 h至融合度為70%~80%。Hp悉尼株1 (SS1)按感染復(fù)數(shù)(MOI) 100加入細(xì)胞中制備損傷模型,人參皂苷Rb3繼續(xù)給藥,共培養(yǎng)48 h。對(duì)照組不加SS1,對(duì)照組和模型組不加藥。改良吉姆薩染色后通過光學(xué)顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài);結(jié)合Hoechst 33342熒光染色和Annexin V/PI雙染流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡;試劑盒法檢測(cè)活性氧(ROS)水平;采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qRT-PCR)檢測(cè)凋亡相關(guān)基因TP53、Bax、Bcl-2表達(dá)量;Western blotting法檢測(cè)P53、p-Akt、cleaved/pro-Caspase 9、Bcl-2、Bax、cleaved/pro-Caspase 3的蛋白表達(dá)情況。結(jié)果 網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)結(jié)果表明三七治療Hp相關(guān)疾病的靶點(diǎn)共16個(gè),其PPI網(wǎng)絡(luò)分析得到按度值大小排名前6位靶點(diǎn)為TP53、CASP3、PTGS2、IL6、TNF、IL1β。GO富集分析與KEGG富集分析結(jié)果均顯示與凋亡相關(guān)。與模型組比較,經(jīng)人參皂苷Rb3處理后,GES-1細(xì)胞的細(xì)胞核染色質(zhì)致密深染,破裂的細(xì)胞逐漸減少;Hoechst 33342熒光染色細(xì)胞核強(qiáng)熒光數(shù)目明顯減少;細(xì)胞凋亡率顯著降低(P<0.05);ROS水平顯著降低(P<0.05);TP53與Bax的mRNA水平顯著降低,Bcl-2 mRNA水平顯著升高(P<0.05); p-Akt、Bcl-2蛋白表達(dá)顯著升高(P<0.05),P53、Bax、cleaved/pro-Caspase 9與cleaved/pro-Caspase 3蛋白表達(dá)顯著降低(P<0.05)。結(jié)論 三七可能通過包括炎癥及凋亡在內(nèi)的多種途徑治療Hp相關(guān)疾病,人參皂苷Rb3對(duì)Hp誘導(dǎo)的胃上皮細(xì)胞凋亡發(fā)揮顯著改善作用,其可能機(jī)制是降低氧化應(yīng)激水平,并調(diào)節(jié)Akt的磷酸化和P53的表達(dá)。"/>

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首頁 > 過刊瀏覽>2022年第45卷第5期 >2022,45(5):833-841. DOI:10.7501/j.issn.1674-6376.2022.05.004
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基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)預(yù)測(cè)三七治療幽門螺桿菌相關(guān)疾病機(jī)制及實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證

Prediction of mechanism of Panax notoginseng in treating Helicobacter pylori related diseases by network pharmacology and experimental verification

發(fā)布日期:2022-05-10
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