-1 C-BSA和弗氏不完全佐劑 1∶1等體積混合乳劑(1 mg·mL-1、5 mL·kg-1),而溶媒對照組動物給予磷酸鹽(PBS)緩沖液與弗氏不完全佐劑 1∶1等體積混合乳劑,sc誘導(dǎo)免疫,每周1次,共2次;加強免疫時,各組動物均尾iv給予C-BSA,溶媒對照組和C-BSA低、中、高劑量組劑量分別為 0、2.5、5.0、10.0 mg·kg-1,每 3天給予 1次,共 5次。造模期末,檢測造模期末小鼠 24 h尿蛋白含量;檢測凝血指標(biāo),包括凝血酶原時間(PT)、活化部分凝血活酶時間(APPT)以及纖維蛋白原含量(Fbg);檢測血清血尿素氮(BUN)、血肌酐(SCr)以及三酰甘油(TG)水平;摘取主要臟器稱質(zhì)量并計算臟體比、臟腦比;HE染色和特殊染色[過碘酸-希夫(PAS)染色、Masson三色染色、過碘酸六胺銀(PASM)染色]后,光學(xué)顯微鏡下檢查腎組織形態(tài)學(xué)改變;免疫組化觀察腎臟補體成分3(C3)、免疫球蛋白G(IgG)、結(jié)蛋白水平;免疫熒光觀察腎臟C3水平;透射電子顯微鏡觀察腎臟腎小球基底膜、足細胞足突的變化及毛細血管內(nèi)皮細胞下有無電子致密物沉積。結(jié)果 C-BSA各劑量組動物在尾iv給予C-BSA后出現(xiàn)不同程度精神萎靡、活動減少、皮膚發(fā)紅和呼吸急促等過敏反應(yīng)癥狀,溶媒對照組動物給藥后無明顯異常;在加強免疫2周后,與溶媒對照組比較,C-BSA低、中和高劑量組動物體質(zhì)量增長顯著緩慢(P<0.05);C-BSA低、中、高劑量組動物尿蛋白呈陽性。與溶媒對照組比較,C-BSA各組動物 BUN、SCr、TG 均未見規(guī)律改變,僅高劑量組動物的 BUN 升高,TG 降低;C-BSA 中 、高劑量組動物 PT 顯著降低(P<0.05),低、中劑量組動物 APPT 顯著降低(P<0.05),低、中、高劑量組動物Fbg含量顯著降低(P<0.001);C-BSA低、中、高劑量組動物腎臟的臟體比顯著升高(P<0.01),且低、中和高劑量組的脾臟絕對質(zhì)量和臟體比亦顯著升高(P<0.05、0.01)。腎臟組織病理學(xué)檢查及特殊染色檢查發(fā)現(xiàn)C-BSA中、高劑量組動物腎小球系膜基質(zhì)增加、基底膜增厚;免疫組化結(jié)果顯示,與溶媒對照組比較,C-BSA低、中、高劑量組動物的C3、IgG、結(jié)蛋白表達水平均顯著升高(P<0.001),高劑量組 IgG水平顯著高于低、中劑量組(P<0.05);免疫熒光結(jié)果顯示,與溶媒對照組比較,C-BSA高劑量組C3水平顯著升高(P<0.001);透射電鏡結(jié)果顯示C-BSA低、中、高劑量組動物腎臟腎小球基底膜增厚、足細胞足突部分融合,C-BSA中、高劑量組動物腎臟腎小球基底膜可見少量電子致密物沉積。結(jié)論 成功建立了免疫復(fù)合物性腎損傷模型和早期、簡便、靈敏的檢測方法,C3、IgG和結(jié)蛋白可作為生物技術(shù)藥物非臨床安全性評價毒性試驗中腎損傷檢測的候選生物標(biāo)志物。"/>

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首頁 > 過刊瀏覽>2023年第46卷第5期 >2023,46(5):934-943. DOI:10.7501/j.issn.1674-6376.2023.05.002
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BALB/c小鼠免疫復(fù)合物性腎損傷模型建立及腎損傷生物標(biāo)志物初步探討

Establishment of a model of immune complex-induced renal injury in BALB/c mice and preliminary study of biomarkers of renal injury

發(fā)布日期:2023-05-09
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