-1的異土木香內(nèi)酯處理24 h對人非小細胞肺癌細胞系(A549)細胞活力的影響;表達綠色熒光蛋白的水皰性口炎病毒(VSV-eGFP)以0.02的感染復數(shù)(MOI)感染A549細胞制備模型,流式細胞術(shù)檢測共同孵育12 h的異土木香內(nèi)酯5、10、20 μmol·L-1對GFP陽性細胞率的影響;VSV感染(MOI=0.1) A549細胞,Western blotting檢測異土木香內(nèi)酯處理16 h對VSV病毒G蛋白表達的影響;分別使用甲型流感病毒(H1N1,MOI=0.1)、腦心肌炎病毒(EMCV,MOI=0.1)感染A549細胞,同時給藥共同孵育8 h后,實時熒光定量PCR (qRT-PCR)檢測土木香內(nèi)酯對病毒RNA表達的影響;異土木香內(nèi)酯分別以預處理12 h、病毒吸附過程中給藥2 h、病毒吸附后給藥10 h 3種不同方式給藥,通過流式細胞術(shù)檢測其對VSV-eGFP在A549細胞中復制的影響;異土木香內(nèi)酯20 μmol·L-1處理胚胎成纖維(MEF)細胞12 h,進行轉(zhuǎn)錄組測序分析;異土木香內(nèi)酯5、10、20 μmol·L-1處理MEF細胞12 h,qRT-PCR檢測干擾素α1(Ifna1)、干擾素β1(Ifnb1)、干擾素誘導蛋白44(Ifi44)、干擾素刺激基因15(Isg15)的mRNA表達。結(jié)果 異土木香內(nèi)酯對A549細胞的半數(shù)抑制濃度(IC50)為51.01 μmol·L-1;與模型組比較,流式結(jié)果顯示異土木香內(nèi)酯顯著減少VSV-eGFP陽性細胞率(P<0.001),但對病毒的吸附過程沒有影響,藥物預處理及吸附后給藥顯著抑制VSV病毒復制(P<0.01、0.001);qRT-PCR結(jié)果顯示異土木香內(nèi)酯顯著降低H1N1、EMCV病毒的mRNA水平(P<0.001);Western blotting結(jié)果顯示異土木香內(nèi)酯顯著抑制VSV的G蛋白表達(P<0.001);轉(zhuǎn)錄組測序分析和qRT-PCR結(jié)果表明,異土木香內(nèi)酯促進I型干擾素通路的激活,并誘導Ifna1、Ifnb1、Ifi44、Isg15(P<0.001)表達。結(jié)論 異土木香內(nèi)酯通過促進基于干擾素通路的抗病毒天然免疫激活,發(fā)揮抑制病毒復制的作用。"/>

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首頁 > 過刊瀏覽>2024年第47卷第3期 >2024,47(3):521-528. DOI:10.7501/j.issn.1674-6376.2024.03.009
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異土木香內(nèi)酯體外抗病毒作用與機制研究

In vitro antiviral function and mechanism of isoalantolactone

發(fā)布日期:2024-03-08
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