-1的異土木香內(nèi)酯處理24 h對(duì)人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系(A549)細(xì)胞活力的影響;表達(dá)綠色熒光蛋白的水皰性口炎病毒(VSV-eGFP)以0.02的感染復(fù)數(shù)(MOI)感染A549細(xì)胞制備模型,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)共同孵育12 h的異土木香內(nèi)酯5、10、20 μmol·L-1對(duì)GFP陽(yáng)性細(xì)胞率的影響;VSV感染(MOI=0.1) A549細(xì)胞,Western blotting檢測(cè)異土木香內(nèi)酯處理16 h對(duì)VSV病毒G蛋白表達(dá)的影響;分別使用甲型流感病毒(H1N1,MOI=0.1)、腦心肌炎病毒(EMCV,MOI=0.1)感染A549細(xì)胞,同時(shí)給藥共同孵育8 h后,實(shí)時(shí)熒光定量PCR (qRT-PCR)檢測(cè)土木香內(nèi)酯對(duì)病毒RNA表達(dá)的影響;異土木香內(nèi)酯分別以預(yù)處理12 h、病毒吸附過(guò)程中給藥2 h、病毒吸附后給藥10 h 3種不同方式給藥,通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)其對(duì)VSV-eGFP在A549細(xì)胞中復(fù)制的影響;異土木香內(nèi)酯20 μmol·L-1處理胚胎成纖維(MEF)細(xì)胞12 h,進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組測(cè)序分析;異土木香內(nèi)酯5、10、20 μmol·L-1處理MEF細(xì)胞12 h,qRT-PCR檢測(cè)干擾素α1(Ifna1)、干擾素β1(Ifnb1)、干擾素誘導(dǎo)蛋白44(Ifi44)、干擾素刺激基因15(Isg15)的mRNA表達(dá)。結(jié)果 異土木香內(nèi)酯對(duì)A549細(xì)胞的半數(shù)抑制濃度(IC50)為51.01 μmol·L-1;與模型組比較,流式結(jié)果顯示異土木香內(nèi)酯顯著減少VSV-eGFP陽(yáng)性細(xì)胞率(P<0.001),但對(duì)病毒的吸附過(guò)程沒(méi)有影響,藥物預(yù)處理及吸附后給藥顯著抑制VSV病毒復(fù)制(P<0.01、0.001);qRT-PCR結(jié)果顯示異土木香內(nèi)酯顯著降低H1N1、EMCV病毒的mRNA水平(P<0.001);Western blotting結(jié)果顯示異土木香內(nèi)酯顯著抑制VSV的G蛋白表達(dá)(P<0.001);轉(zhuǎn)錄組測(cè)序分析和qRT-PCR結(jié)果表明,異土木香內(nèi)酯促進(jìn)I型干擾素通路的激活,并誘導(dǎo)Ifna1、Ifnb1、Ifi44、Isg15(P<0.001)表達(dá)。結(jié)論 異土木香內(nèi)酯通過(guò)促進(jìn)基于干擾素通路的抗病毒天然免疫激活,發(fā)揮抑制病毒復(fù)制的作用。"/>

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首頁(yè) > 過(guò)刊瀏覽>2024年第47卷第3期 >2024,47(3):521-528. DOI:10.7501/j.issn.1674-6376.2024.03.009
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異土木香內(nèi)酯體外抗病毒作用與機(jī)制研究

In vitro antiviral function and mechanism of isoalantolactone

發(fā)布日期:2024-03-08
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