-1)對(duì)A549細(xì)胞增殖、遷移和克隆形成的抑制作用;A549細(xì)胞預(yù)孵育芒柄花素24 h后,使用Hoechst 33342細(xì)胞核染色定位,加入經(jīng)過Dil標(biāo)記的Jurkat細(xì)胞(人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞)共培養(yǎng)30 min,使用激光共聚焦拍攝2種細(xì)胞的共定位圖像;建立A549-Jurkat細(xì)胞共培養(yǎng)模型,MTT和結(jié)晶紫染色法檢測芒柄花素對(duì)A549細(xì)胞活性的影響;試劑盒法檢測A549細(xì)胞線粒體膜電位(JC-1染色)和谷胱甘肽(GSH)水平探究芒柄花素對(duì)線粒體應(yīng)激的誘導(dǎo)作用;Western blotting法考察芒柄花素對(duì)A549細(xì)胞線粒體應(yīng)激后非經(jīng)典焦亡相關(guān)蛋白和PD-L1蛋白表達(dá)的影響。結(jié)果 與對(duì)照組比較,芒柄花素顯著抑制A549細(xì)胞的增殖、遷移和克隆形成能力(P<0.01、0.001),增強(qiáng)細(xì)胞共培養(yǎng)模型中T細(xì)胞的募集和殺傷作用(P<0.01、0.001);芒柄花素可誘導(dǎo)A549細(xì)胞線粒體應(yīng)激,誘導(dǎo)線粒體膜電位下降,顯著降低細(xì)胞GSH水平(P<0.05、0.01),顯著上調(diào)bcl-2相關(guān)x蛋白(BAX)、裂解的半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶-3(cleaved-Caspase-3)、穿孔素蛋白E (Gasdermin E)-N蛋白表達(dá)誘導(dǎo)細(xì)胞焦亡(P<0.01、0.001),同時(shí)顯著下調(diào)p-磷酸化磷脂酰肌醇3激酶(p-PI3K)、蛋白激酶B (Akt)、核因子κB (NF-κB)、細(xì)胞程序性死亡-配體1(PD-L1)蛋白表達(dá)抑制免疫逃逸(P<0.05、0.001)。結(jié)論 芒柄花素具有誘導(dǎo)NSCLC細(xì)胞焦亡并阻斷免疫逃逸的作用,其機(jī)制為一方面可通過誘導(dǎo)A549細(xì)胞線粒體應(yīng)激,促進(jìn)細(xì)胞焦亡招募T細(xì)胞,增強(qiáng)腫瘤免疫;另一方面抑制p-PI3K/Akt/NF-κB信號(hào)軸,進(jìn)而降低PD-L1蛋白表達(dá),抑制A549細(xì)胞免疫逃逸。"/>

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首頁 > 過刊瀏覽>2024年第47卷第5期 >2024,47(5):971-981. DOI:10.7501/j.issn.1674-6376.2024.05.007
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芒柄花素誘導(dǎo)肺癌細(xì)胞焦亡并抑制PD-L1介導(dǎo)的免疫逃逸

Formononetin induces pyroptosis in lung cancer cells and inhibits PD-L1- mediated immune escape

發(fā)布日期:2024-05-11
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