Ⓡ AQ-C18色譜柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),流動相為甲醇-水溶液,梯度洗脫,體積流量1.0 mL·min-1,檢測波長270 nm,柱溫30℃。建立12批雞骨草和6批毛雞骨草的指紋圖譜并進行相似度評價和特征峰匹配。結(jié)合聚類分析(CA)、主成分分析(PCA)及正交偏最小二乘法-判別分析(OPLS-DA)確定雞骨草和毛雞骨草的差異性特征成分,并對其中2種成分進行定量測定。通過中藥系統(tǒng)藥理學(xué)數(shù)據(jù)庫與分析平臺(TCMSP)篩選雞骨草活性成分及其潛在靶點,并利用GeneCards數(shù)據(jù)庫篩選肝癌相關(guān)靶點,結(jié)合韋恩圖分析獲取共有靶點?;诠灿邪悬c,進行基因本體(GO)和京都基因與基因組百科全書(KEGG)分析,揭示雞骨草治療肝癌的關(guān)鍵通路。使用STRING 11.5數(shù)據(jù)庫構(gòu)建靶點蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)相互作用(PPI)網(wǎng)絡(luò),并構(gòu)建藥物-成分-疾病-靶點-通路網(wǎng)絡(luò),確定主要活性成分。采用MTT法確定雞骨草醇提物(ACEE)對HepG2細胞的最佳用藥劑量,并應(yīng)用實時熒光定量PCR(qRTPCR)實驗檢測排名前5的mRNA表達量。結(jié)果 建立了12批雞骨草和6批毛雞骨草樣品的指紋圖譜,標定10個共有峰,共指認其中5個主要特征峰:峰1為相思子堿、峰2為刺桐堿、峰5為維采寧-2、峰8為夏佛塔苷、峰9為異夏佛塔苷。通過化學(xué)模式識別篩選得到峰3、峰5(維采寧-2)、峰6、峰7、峰8(夏佛塔苷)、峰9(異夏佛塔苷)所代表的成分是區(qū)分不同批次樣品的差異性標志物,其中維采寧-2和夏佛塔苷的質(zhì)量分數(shù)分別為0.05~4.36 mg·g-1、0.10~4.34 mg·g-1,不同批次間差異較大。網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)結(jié)合指紋圖譜指認共確定9個活性成分,265個潛在靶點,與肝癌共有靶點130個。KEGG富集分析共得到112條信號通路,主要涉及癌癥通路、脂質(zhì)與動脈粥樣硬化通路等。根據(jù)活性成分-靶點-通路網(wǎng)絡(luò)篩選出5個肝癌關(guān)鍵靶點。根據(jù)MTT結(jié)果,最終選擇質(zhì)量濃度0.25 mg·mL-1的ACEE進行qRT-PCR實驗,與對照組比較,關(guān)鍵靶點AKT1、PIK3CA、STAT3、BCL2、GSK3B的mRNA表達水平顯著下降(P<0.001)。結(jié)論 建立的指紋圖譜及含量測定方法簡便可行,網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)篩選出的關(guān)鍵靶點經(jīng)體外實驗證明與雞骨草抗肝癌的作用機制密切相關(guān),為雞骨草質(zhì)量的控制和藥效機制的研究提供參考。"/>

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首頁 > 過刊瀏覽>2025年第48卷第7期 >2025,48(7):1893-1905. DOI:10.7501/j.issn.1674-6376.2025.07.018
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雞骨草和毛雞骨草指紋圖譜的建立、含量測定及抗肝癌作用機制研究

Establishment of fingerprint spectra, content determination, and antihepatocellular carcinoma activity mechanism of Abrus cantoniensis and Abrus mollis

發(fā)布日期:2025-07-05
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