Ⓡ AQ-C18色譜柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),流動相為甲醇-水溶液,梯度洗脫,體積流量1.0 mL·min-1,檢測波長270 nm,柱溫30℃。建立12批雞骨草和6批毛雞骨草的指紋圖譜并進行相似度評價和特征峰匹配。結合聚類分析(CA)、主成分分析(PCA)及正交偏最小二乘法-判別分析(OPLS-DA)確定雞骨草和毛雞骨草的差異性特征成分,并對其中2種成分進行定量測定。通過中藥系統(tǒng)藥理學數(shù)據(jù)庫與分析平臺(TCMSP)篩選雞骨草活性成分及其潛在靶點,并利用GeneCards數(shù)據(jù)庫篩選肝癌相關靶點,結合韋恩圖分析獲取共有靶點?;诠灿邪悬c,進行基因本體(GO)和京都基因與基因組百科全書(KEGG)分析,揭示雞骨草治療肝癌的關鍵通路。使用STRING 11.5數(shù)據(jù)庫構建靶點蛋白質與蛋白質相互作用(PPI)網絡,并構建藥物-成分-疾病-靶點-通路網絡,確定主要活性成分。采用MTT法確定雞骨草醇提物(ACEE)對HepG2細胞的最佳用藥劑量,并應用實時熒光定量PCR(qRTPCR)實驗檢測排名前5的mRNA表達量。結果 建立了12批雞骨草和6批毛雞骨草樣品的指紋圖譜,標定10個共有峰,共指認其中5個主要特征峰:峰1為相思子堿、峰2為刺桐堿、峰5為維采寧-2、峰8為夏佛塔苷、峰9為異夏佛塔苷。通過化學模式識別篩選得到峰3、峰5(維采寧-2)、峰6、峰7、峰8(夏佛塔苷)、峰9(異夏佛塔苷)所代表的成分是區(qū)分不同批次樣品的差異性標志物,其中維采寧-2和夏佛塔苷的質量分數(shù)分別為0.05~4.36 mg·g-1、0.10~4.34 mg·g-1,不同批次間差異較大。網絡藥理學結合指紋圖譜指認共確定9個活性成分,265個潛在靶點,與肝癌共有靶點130個。KEGG富集分析共得到112條信號通路,主要涉及癌癥通路、脂質與動脈粥樣硬化通路等。根據(jù)活性成分-靶點-通路網絡篩選出5個肝癌關鍵靶點。根據(jù)MTT結果,最終選擇質量濃度0.25 mg·mL-1的ACEE進行qRT-PCR實驗,與對照組比較,關鍵靶點AKT1、PIK3CA、STAT3、BCL2、GSK3B的mRNA表達水平顯著下降(P<0.001)。結論 建立的指紋圖譜及含量測定方法簡便可行,網絡藥理學篩選出的關鍵靶點經體外實驗證明與雞骨草抗肝癌的作用機制密切相關,為雞骨草質量的控制和藥效機制的研究提供參考。"/>

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首頁 > 過刊瀏覽>2025年第48卷第7期 >2025,48(7):1893-1905. DOI:10.7501/j.issn.1674-6376.2025.07.018
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雞骨草和毛雞骨草指紋圖譜的建立、含量測定及抗肝癌作用機制研究

Establishment of fingerprint spectra, content determination, and antihepatocellular carcinoma activity mechanism of Abrus cantoniensis and Abrus mollis

發(fā)布日期:2025-07-05
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