摘要: 目的 采用超高效液相色譜-四級(jí)桿飛行時(shí)間質(zhì)譜(UHPLC-Q-TOF-MS)定性分析通絡(luò)明目膠囊(Tongluo Mingmu Capsule,TLMMC)的化學(xué)成分譜。方法 固定相為Acquity Uplc HSS T3色譜柱(100 mm×2.1 mm,1.8 µm),流動(dòng)相A為0.1%甲酸水溶液,流動(dòng)相B為0.1%甲酸乙腈溶液,梯度洗脫,體積流量0.30 mL/min,進(jìn)樣量5 mL。整合中藥系統(tǒng)藥理學(xué)數(shù)據(jù)庫(kù)(traditional Chinese medicine systems pharmacology database and analysis platform,TCMSP)、中藥綜合數(shù)據(jù)庫(kù)(traditional Chinese medicine integrated database,TCMID)、ChemSpider(http://www.ChemSpider.com/)、Chemical Book(http://www. chemicalbook.com/)和相關(guān)文獻(xiàn),建立了TLMMC的內(nèi)部數(shù)據(jù)庫(kù)。根據(jù)已有對(duì)照品的相對(duì)分子質(zhì)量與質(zhì)譜碎片離子信息,結(jié)合上述內(nèi)部數(shù)據(jù)庫(kù)對(duì)成分進(jìn)行定性鑒別。結(jié)果 從TLMMC中共定性鑒別了82種化學(xué)成分,采用已有對(duì)照品的保留時(shí)間、精確相對(duì)分子質(zhì)量及碎片離子的對(duì)比,確定了其中42種成分;通過(guò)精確相對(duì)分子質(zhì)量及碎片離子的比對(duì)推測(cè)了另外40種成分的可能存在。82種化學(xué)成分包括36種黃酮、11種三萜皂苷、11種單萜、8種蒽醌以及16種其他化合物;其中13種化學(xué)成分來(lái)自黃芪、13種化學(xué)成分來(lái)自銀杏葉、8種化學(xué)成分來(lái)自赤芍、8種化學(xué)成分來(lái)自墨旱蓮、6種化學(xué)成分來(lái)自地黃、6種化學(xué)成分來(lái)自粉葛、5種化學(xué)成分來(lái)自決明子、5種化學(xué)成分來(lái)自大黃、5種化學(xué)成分來(lái)自三七、5種化學(xué)成分來(lái)自蒲黃、4種化學(xué)成分來(lái)自女貞子、4種化學(xué)成分來(lái)自地龍。結(jié)論 建立的UHPLC-Q-TOF-MS法可快速、全面地分析TLMMC的化學(xué)輪廓;采用該方法共鑒定了82種成分,涵蓋制劑中的全部12味中藥。本結(jié)果較為系統(tǒng)地闡明了TLMMC的藥效物質(zhì)基礎(chǔ),為其起效機(jī)制的解析和臨床合理應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。
摘要: 目的 旨在建立一種基于生物傳感器聯(lián)合超高效液相色譜/串聯(lián)質(zhì)譜(ultra-performance liquid chromatography with electrospray tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)的中藥苦味關(guān)鍵質(zhì)量屬性辨識(shí)方法。以白術(shù)內(nèi)酯類成分為研究對(duì)象,通過(guò)分子對(duì)接與生物傳感技術(shù)揭示其與苦味受體的相互作用機(jī)制,實(shí)現(xiàn)苦味屬性從傳統(tǒng)經(jīng)驗(yàn)判定到分子水平表征的跨越,為完善白術(shù)質(zhì)量控制體系提供支撐。方法 采用D101大孔吸附樹脂結(jié)合紫外分光光度法,制備并篩選富含內(nèi)酯類成分的白術(shù)組分;通過(guò)UPLC-MS/MS與分子對(duì)接技術(shù),在分子水平解析白術(shù)組分與味覺(jué)受體的相互作用特征;采用生物傳感器與UPLC-MS/MS聯(lián)用技術(shù),實(shí)現(xiàn)白術(shù)組分苦味關(guān)鍵質(zhì)量屬性的精準(zhǔn)辨識(shí)。結(jié)果 成功制得白術(shù)不同極性組分11個(gè),其中白術(shù)醇提物70%組分的總內(nèi)酯含量最高,為后續(xù)性味研究的理想載體;分子對(duì)接實(shí)驗(yàn)顯示白術(shù)組分與II型味覺(jué)受體家族14號(hào)成員(taste receptor type 2 member 14,TAS2R14)的結(jié)合展現(xiàn)出明顯優(yōu)勢(shì),在分子層面揭示了白術(shù)組分具有強(qiáng)烈趨于苦味屬性的作用特質(zhì);進(jìn)一步構(gòu)建苦味生物傳感器,對(duì)白術(shù)組分的苦味屬性進(jìn)行表征,結(jié)果顯示白術(shù)組分與TAS2R14的相互結(jié)合強(qiáng)度為49.0 ng/L,屬于強(qiáng)相互作用,表明以內(nèi)酯類成分為主的白術(shù)組分具有顯著的苦味屬性,該結(jié)果與分子對(duì)接結(jié)果相互印證,增強(qiáng)了實(shí)驗(yàn)結(jié)論的可靠性;最后,聯(lián)合UPLC-MS/MS技術(shù),共辨識(shí)得到包括白術(shù)內(nèi)酯II在內(nèi)的苦味關(guān)鍵質(zhì)量屬性13個(gè),在物質(zhì)基礎(chǔ)層面表明白術(shù)組分與苦味受體TAS2R14的結(jié)合受關(guān)鍵質(zhì)量屬性驅(qū)動(dòng),為理解白術(shù)內(nèi)酯類成分苦味特性提供直接證據(jù)。結(jié)論 通過(guò)多技術(shù)融合的系統(tǒng)性研究,從分子相互作用到物質(zhì)基礎(chǔ)層面揭示了白術(shù)內(nèi)酯類成分苦味屬性的本質(zhì),所發(fā)現(xiàn)的苦味關(guān)鍵質(zhì)量屬性為建立基于苦味特征的白術(shù)質(zhì)量控制方法奠定了理論基礎(chǔ),此外,提出的技術(shù)路線為中藥苦味物質(zhì)基礎(chǔ)研究提供了新的方法學(xué)參考。
摘要: 抑郁癥作為一種多維度病理異質(zhì)性疾病,其病理機(jī)制與線粒體功能障礙引發(fā)的能量代謝紊亂密切相關(guān),尤見(jiàn)疲勞、動(dòng)力缺失等核心癥狀。中醫(yī)認(rèn)為“郁證”本質(zhì)在于五臟氣機(jī)失調(diào),而現(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn),線粒體作為細(xì)胞能量樞紐,其質(zhì)量控制系統(tǒng)(mitochondrial quality control system,MQCS)主導(dǎo)的“能量代謝-氧化還原-免疫穩(wěn)態(tài)”級(jí)聯(lián)反應(yīng),與中醫(yī)“氣”的功能高度契合。MQCS失衡會(huì)破壞“氣血-臟腑-神志”動(dòng)態(tài)平衡,從而在分子層面闡釋“氣機(jī)失調(diào)”致郁的病理基礎(chǔ),為“調(diào)和五臟”抗抑郁治則提供科學(xué)依據(jù)。通過(guò)整合多源數(shù)據(jù)庫(kù),應(yīng)用CiteSpace軟件與系統(tǒng)藥理學(xué)方法,構(gòu)建MQCS動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)體系,解析中藥復(fù)方調(diào)控線粒體功能的時(shí)空網(wǎng)絡(luò)作用,揭示其多級(jí)聯(lián)反應(yīng)機(jī)制。創(chuàng)新性地將中醫(yī)抽象思維轉(zhuǎn)化為可量化的參數(shù)體系,搭建了從“宏觀辨證”到“微觀適配”的轉(zhuǎn)化橋梁,為精準(zhǔn)醫(yī)學(xué)框架下的個(gè)體化診療提供可操作化的方法學(xué)基礎(chǔ),同時(shí)為中西醫(yī)整合醫(yī)學(xué)的迭代升級(jí)奠定理論基石。
摘要: 天麻Gastrodiae Rhizoma已有兩千多年的藥用及食用歷史,是一種名貴的藥食同源中藥。多糖作為天麻中重要的活性成分之一,具有抗氧化、抗衰老、抗炎、抑菌、抑制腫瘤、增強(qiáng)免疫、改善記憶、治療心腦血管疾病、神經(jīng)系統(tǒng)疾病、緩解非酒精性脂肪肝、緩解骨質(zhì)疏松、調(diào)節(jié)腸道微生物等功效,在食品、功能性食品、醫(yī)藥和化妝品領(lǐng)域有廣闊的應(yīng)用前景。通過(guò)中國(guó)知網(wǎng)、Web of Science等數(shù)據(jù)庫(kù)查閱國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn),分析當(dāng)前天麻多糖的研究現(xiàn)狀及熱點(diǎn);綜述天麻多糖的提取純化、結(jié)構(gòu)表征、結(jié)構(gòu)修飾、藥理活性及其在食品、保健品、藥品、化妝品等領(lǐng)域的應(yīng)用進(jìn)展,為天麻多糖的深入研究和廣泛應(yīng)用提供理論基礎(chǔ)。