摘要:
目的 探討牡荊苷通過調(diào)控核轉(zhuǎn)錄因子E2相關(guān)因子2(Nrf2)/抗氧化反應(yīng)元件(ARE)通路對(duì)急性腦缺血再灌注大鼠氧化應(yīng)激反應(yīng)的作用。方法 54只SD大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組、模型組、陽性對(duì)照依達(dá)拉奉(0.56 mg/kg)組和牡荊苷低、中、高劑量(10、20、40 mg/kg)組,除假手術(shù)組外均制備急性腦缺血大鼠模型,再灌注后假手術(shù)組、模型組大鼠ip生理鹽水,依達(dá)拉奉組和牡荊苷各劑量組按照相應(yīng)劑量ip給藥,8 h給藥1次,共3次。對(duì)比干預(yù)前后大鼠神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分;HE染色檢測大鼠大腦皮質(zhì)病理變化;試劑盒檢測大鼠大腦皮質(zhì)組織氧化應(yīng)激指標(biāo)丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)水平;實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qRT-PCR)和Western blotting檢測大鼠大腦皮層Nrf2/ARE通路相關(guān)基因mRNA與蛋白表達(dá)水平。結(jié)果 干預(yù)前后假手術(shù)組大鼠神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分無明顯變化,模型組較干預(yù)前增高(P<0.01),依達(dá)拉奉組、牡荊苷各劑量組均較干預(yù)前降低(P<0.01),且干預(yù)后各組間神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分比較差異顯著(P<0.01)。假手術(shù)組大鼠大腦皮質(zhì)組織神經(jīng)細(xì)胞分布均勻、密集,神經(jīng)細(xì)胞的胞體、胞核形態(tài)正常;模型組、依達(dá)拉奉組和牡荊苷各劑量組大鼠腦組織神經(jīng)細(xì)胞排列均有紊亂、疏松,其中模型組可見液化性壞死、細(xì)胞結(jié)構(gòu)消失等表現(xiàn);牡荊苷低劑量組可見細(xì)胞排列嚴(yán)重紊亂、疏松,部分液化性壞死、細(xì)胞結(jié)構(gòu)消失;牡荊苷中劑量組和依達(dá)拉奉組液化性壞死部分面積小,大多細(xì)胞結(jié)構(gòu)正常;牡荊苷高劑量組僅可見極少液化性壞死,細(xì)胞結(jié)構(gòu)基本正常,細(xì)胞排列輕微紊亂。與假手術(shù)組比較,模型組大鼠大腦皮質(zhì)MDA和NO水平顯著升高(P<0.01),SOD和GSH水平顯著降低(P<0.01),Nrf2、γ-GCS mRNA表達(dá)水平顯著升高(P<0.01),細(xì)胞質(zhì)Nrf2、γ-GCS蛋白表達(dá)水平均顯著升高(P<0.01),細(xì)胞核Nrf2、HO-1蛋白表達(dá)水平均顯著降低(P<0.01)。與模型組比較,依達(dá)拉奉組和牡荊苷低、中、高劑量組大鼠大腦皮質(zhì)MDA和NO水平均顯著降低(P<0.01),SOD和GSH水平顯著升高(P<0.01),Nrf2、γ-GCS mRNA表達(dá)水平顯著降低(P<0.01),細(xì)胞質(zhì)Nrf2、γ-GCS蛋白表達(dá)水平均顯著降低(P<0.01),細(xì)胞核Nrf2、HO-1蛋白表達(dá)水平均顯著升高(P<0.01)。且牡荊苷各劑量組大鼠大腦皮質(zhì)MDA、NO、SOD、GSH水平及Nrf2、γ-GCS、HO-1 mRNA和蛋白表達(dá)水平均呈劑量依賴性,組間差異顯著(P<0.01)。結(jié)論 牡荊苷可減輕急性腦缺血再灌注大鼠氧化應(yīng)激反應(yīng),推測與調(diào)控Nrf2/ARE信號(hào)通路,上調(diào)Nrf2基因與蛋白表達(dá),促進(jìn)其由細(xì)胞質(zhì)向細(xì)胞核移動(dòng),上調(diào)HO-1表達(dá),抑制γ-GCS表達(dá),增強(qiáng)機(jī)體的抗氧化應(yīng)激反應(yīng)能力有關(guān)。