謝麗華
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樊星
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吳純啟
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井瀟
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李曼
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董延生
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韓剛
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王全軍
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王茜莎
摘要:
目的 基于脂多糖(LPS)誘導大鼠肝臟損傷建立何首烏肝毒性模型,探究何首烏乙醇提取液(AEP)對大鼠細胞色素P450(CYP450)酶主要亞型活性及蛋白表達的影響。方法 雄性SD大鼠100只,隨機分為6組:對照組、LPS組、對乙酰氨基酚(APAP)組、(LPS+APAP)組、AEP組和(LPS+AEP)組。尾iv 4 mg/kg LPS,2 h后,按組別分別ig 625 mg/kg APAP和6 g/kg AEP,每天1次,連續(xù)給藥7 d,每天觀察大鼠體質量變化。在建模過程中,取第2、14小時和5、8天4個不同時間點,分別對各組別動物麻醉后取血,檢測肝功能生化指標丙氨酸氨基轉移酶(ALT)、天門冬氨酸氨基轉移酶(AST)和堿性磷酸酶(ALP)活性;解剖,記錄肝臟質量;蘇木精-伊紅(HE)染色進行組織病理學檢查;試劑盒法測定肝細胞中細胞色素CYP1A2、CYP2E1、CYP3A1活性的變化;提取肝臟蛋白,應用Western blotting法檢測CYP1A2、CYP2E1、CYP3A1蛋白表達情況。結果 與對照組比較,第2和14小時,LPS組、(LPS+APAP)組和(LPS+AEP)組ALT、AST和ALP活性顯著升高;組織病理學檢查發(fā)現(xiàn),肝細胞灶狀壞死,伴炎細胞浸潤;給藥后第8天,LPS組組織病理學檢查正常,但(LPS+AEP)組可見顯著肝細胞變性,局部慢性炎性灶。第8天,AEP組大鼠肝臟CYP1A2、CYP2E1、CYP3A1的活性明顯降低;Western blotting法檢測發(fā)現(xiàn),AEP能顯著降低大鼠肝臟CYP1A2蛋白的表達,而對CYP2E1和CYP3A1蛋白表達沒有顯著影響。結論 經LPS誘導,AEP對SD大鼠產生明顯的肝臟毒性,毒性的發(fā)生及LPS誘發(fā)的免疫作用與抑制CYP1A2、CYP2E1、CYP3A1的活性和抑制CYP1A2蛋白表達有關。