摘要:
目的 研究少腹逐瘀湯對(duì)輸卵管炎性不孕大鼠Nod樣受體蛋白3(NLRP3)炎癥小體的作用。方法 采用金黃色葡萄球菌法構(gòu)建大鼠輸卵管炎性不孕模型,造模成功雌性大鼠隨機(jī)分為3組:模型組、少腹逐瘀湯(以生藥計(jì)5g·kg-1,臨床等效劑量)組、鹽酸左氧氟沙星(陽性藥,80mg·kg-1)組,另取10只大鼠作為對(duì)照組。各組于成模后第8天開始ig給藥,每天1次,連續(xù)30d,對(duì)照組和模型組ig等量0.9%氯化鈉注射液。各組雌鼠與成熟雄鼠按2∶1合籠,觀察受孕率;HE染色觀察各組大鼠輸卵管病理變化;Western blotting法檢測(cè)輸卵管組織中NLRP3蛋白表達(dá);實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qRTPCR)法檢測(cè)輸卵管組織中NLRP3和白細(xì)胞介素-1β(IL-1β)mRNA水平。原代培養(yǎng)大鼠輸卵管上皮細(xì)胞,10nmol·L-1脂多糖(LPS)刺激24h制備炎癥模型,造模同時(shí)給予10mg·L-1鹽酸左氧氟沙星、10mg·L-1少腹逐瘀湯處理,Western blotting法檢測(cè)細(xì)胞NLRP3蛋白表達(dá);qRT-PCR法檢測(cè)細(xì)胞中NLRP3、IL-1β、白細(xì)胞介素-6(IL-6)和腫瘤壞死因子-α(TNF-α)mRNA水平。結(jié)果 對(duì)照組的受孕率為60%,模型組的受孕率為40%,鹽酸左氧氟沙星組和少腹逐瘀湯組的受孕率均為80%。對(duì)照組大鼠輸卵管結(jié)構(gòu)清晰,黏膜皺褶豐富,黏膜上皮細(xì)胞排列整齊,管腔通暢;模型組大鼠的輸卵管結(jié)構(gòu)分界欠清,黏膜皺褶消失,黏膜上皮細(xì)胞排列紊亂,管腔狹窄,出現(xiàn)梗阻和大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)等情況;鹽酸左氧氟沙星組與少腹逐瘀湯組大鼠輸卵管結(jié)構(gòu)有改善,管壁組織結(jié)構(gòu)尚清晰,黏膜上皮細(xì)胞排列欠規(guī)整,管腔通暢,僅少量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。與對(duì)照組比較,模型組大鼠輸卵管組織的NLRP3蛋白和NLRP3、IL-1βmRNA水平顯著上調(diào)(P<0.001);與模型組比較,少腹逐瘀湯組輸卵管組織的NLRP3蛋白和NLRP3、IL-1βmRNA水平顯著下降(P<0.05、0.001)。與對(duì)照組比較,模型組輸卵管上皮細(xì)胞NLRP3蛋白和NLRP3、IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA水平顯著上調(diào)(P<0.05、0.01、0.001);與模型組比較,少腹逐瘀湯組NLRP3蛋白和NLRP3、IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA水平顯著下降(P<0.05、0.01)。結(jié)論 少腹逐瘀湯治療輸卵管炎性不孕癥的作用機(jī)制可能與調(diào)節(jié)NLRP3介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)有關(guān)。