摘要:
目的 觀察梔子苷對腦缺血再灌注損傷(CIRI)模型大鼠的神經(jīng)保護(hù)作用及對胰高血糖素樣肽-1受體(GLP-1R)/蛋白激酶B(Akt)信號通路的影響。方法 50只SD大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組,模型組,梔子苷低、高劑量組及尼莫地平片組,每組10只。采用線栓法制備CIRI大鼠模型,缺血2 h再灌注24 h后,梔子苷低、高劑量組大鼠分別ig給予10、40 mg·kg-1的梔子苷,尼莫地平片組大鼠ig給予8.1 mg·kg-1尼莫地平,假手術(shù)組和模型組大鼠ig等體積生理鹽水,每天1次,連續(xù)7 d。造模后及給藥結(jié)束后,分別對各組大鼠進(jìn)行神經(jīng)功能缺損評分;給藥結(jié)束后,采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測血清中腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白細(xì)胞介素-1β(IL-1β)及白細(xì)胞介素-6(IL-6)水平,蘇木素-伊紅(HE)染色檢測腦組織病理學(xué)變化,尼氏染色檢測神經(jīng)元與尼氏小體變化,免疫組化染色檢測腦組織B淋巴細(xì)胞瘤-2(Bcl-2)和Bcl-2關(guān)聯(lián)X蛋白(Bax)表達(dá),蛋白質(zhì)印跡法(Western blotting)檢測腦組織細(xì)胞色素C(Cyt-C)、半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、半胱氨酸蛋白酶-9(Caspase-9)、胰高血糖素樣肽-1受體(GLP-1R)及磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)蛋白表達(dá)水平。結(jié)果 與假手術(shù)組比較,模型組大鼠神經(jīng)功能缺損評分顯著升高(P<0.05),血清中TNF-α、IL-1β、IL-6水平顯著升高(P<0.05);皮質(zhì)細(xì)胞間質(zhì)疏松、增寬,有大量神經(jīng)元細(xì)胞質(zhì)萎縮和細(xì)胞核損傷;腦神經(jīng)元皺縮,尼氏小體變小,數(shù)目明顯減少。大鼠腦組織Bcl-2表達(dá)顯著降低(P<0.05),Bax表達(dá)顯著升高(P<0.05);腦組織中Cyt-C、Caspase-3、Caspase-9蛋白表達(dá)水平顯著升高(P<0.05),GLP-1R和p-Akt蛋白表達(dá)水平顯著降低(P<0.05)。與模型組比較,梔子苷高劑量組和尼莫地平片組大鼠神經(jīng)功能缺損評分均顯著降低(P<0.05),血清中TNF-α、IL-1β、IL-6水平顯著降低(P<0.05),皮質(zhì)細(xì)胞較為整齊,神經(jīng)元細(xì)胞和尼氏小體損傷減小,Bcl-2表達(dá)顯著升高(P<0.05),Bax表達(dá)顯著降低(P<0.05),同時,Cyt-C、Caspase-3及Caspase-9蛋白表達(dá)水平顯著下降(P<0.05),GLP-1R和p-Akt蛋白表達(dá)水平顯著升高(P<0.05)。結(jié)論 梔子苷能夠改善大鼠CIRI,減少神經(jīng)元凋亡,其作用機(jī)制可能與激活GLP-1R/Akt信號通路有關(guān)。