摘要:
目的 探討白頭翁皂苷 B4和常春藤皂苷 C(HSC,又名白頭翁皂苷 B5)質(zhì)量比為 4∶1的組合物對帕金森病和阿爾茨海默病模型小鼠的保護(hù)作用及機(jī)制。方法 取60只健康雄性C57BL/6小鼠,隨機(jī)抽取10只作為對照組,剩余50只小鼠ip1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氫吡啶(MPTP)制備帕金森?。≒D)模型,模型構(gòu)建成功后隨機(jī)分為模型組、左旋多巴胺片(陽性對照,30 mg·kg-1)組和白頭翁皂苷B4+HSC高、中、低劑量(20、10、5 mg·kg-1)組,每組10只,ig給藥14 d,每天1次,對照、模型組小鼠ig等量0.9%的氯化鈉溶液。每2天觀察動物震顫行為出現(xiàn)與消失的時間,于給藥第7、14天展開行為學(xué)實(shí)驗(yàn)并記錄評分;HE染色法觀察腦組織黑質(zhì)病理學(xué)變化;免疫組化檢測腦組織 α-突觸核蛋白表達(dá);實(shí)時熒光定量 PCR(qRTPCR)檢測小鼠腦組織多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)體(DAT)、酪氨酸羥化酶(TH)mRNA表達(dá)。將 50只 APP/PS1轉(zhuǎn)基因小鼠隨機(jī)分為模型組、鹽酸多奈哌齊(陽性藥,1.5 mg·kg-1)組和白頭翁皂苷B4+HSC高、中、低劑量(20、10、5 mg·kg-1)組,取 10只同背景 APP/PS1轉(zhuǎn)基因陰性小鼠作為對照組,每天1次,連續(xù)ig給藥28 d,模型組和對照組ig等量0.9%的氯化鈉溶液。給藥結(jié)束后進(jìn)行行為學(xué)實(shí)驗(yàn)并記錄評分;ELISA法檢測小鼠血清中炎癥因子白細(xì)胞介素(IL-6、IL-1β)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)水平、環(huán)氧化酶 2(COX-2)和氧化應(yīng)激因子活性氧(ROS),試劑盒檢測超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)水平。結(jié)果 在 PD模型小鼠中,與模型組比較,白頭翁皂苷 B4+HSC顯著降低震顫麻痹評分(P<0.01、0.001),顯著降低曠場實(shí)驗(yàn)評分(P<0.01、0.001),顯著降低爬桿實(shí)驗(yàn)評分(P<0.01、0.001),顯著降低懸掛實(shí)驗(yàn)評分(P<0.01、0.001),顯著降低游泳實(shí)驗(yàn)評分(P<0.01、0.001),顯著降低行為學(xué)實(shí)驗(yàn)綜合評分(P<0.001),明顯改善黑質(zhì)體結(jié)構(gòu)損傷,明顯降低α-突觸核蛋白表達(dá),顯著升高小鼠腦組織DAT和TH mRNA水平(P<0.05、0.01、0.001)。在AD模型小鼠中,與模型組比較,白頭翁皂苷 B4+HSC顯著縮短水迷宮定位航行實(shí)驗(yàn)逃避潛伏期(P<0.001),明顯延長在目標(biāo)象限的累計(jì)停留時間(P<0.05、0.01、0.001),顯著增加準(zhǔn)確穿越平臺所在位置的次數(shù)(P<0.05、0.01),顯著降低血清炎癥因子水平(P<0.05、0.01、0.001),顯著降低 ROS水平、升高 SOD和 GSH-Px的水平(P<0.05、0.01、0.001)。結(jié)論 白頭翁皂苷+HSC對 PD和 AD小鼠具有保護(hù)作用,可能通過發(fā)揮抗炎、抗氧化,改善腦組織和神經(jīng)元損傷等來實(shí)現(xiàn)。